遺傳發(fā)育所作物基因組單堿基編輯方法研究取得進(jìn)展
2018-05-31
如何快速高效進(jìn)行突變體檢測(cè)和鑒定是植物基因組編輯技術(shù)迅速發(fā)展面臨的重要問(wèn)題之一。目前植物基因組編輯突變檢測(cè)方法主要包括PCR/RE、T7EI錯(cuò)配切割、臨界退火溫度PCR (ACT-PCR)、Sanger測(cè)序和二代測(cè)序(NGS)等。以上所有的檢測(cè)方法都基于PCR反應(yīng),且都有各自的不足之處。PCR/RE方法的需要設(shè)計(jì)含有限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)的靶位點(diǎn);T7EI無(wú)法區(qū)分純合突變體和野生型以及雜合突變體與雙等位突變體;ACT-PCR對(duì)PCR反應(yīng)條件要求極高,而且無(wú)法檢測(cè)到雜合突變;Sanger測(cè)序和NGS的價(jià)格比較昂貴,尤其是對(duì)于數(shù)目比較大的群體。
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